Materyalên nebat û pathogen
Pat Brown li Zanîngeha Illinois (niha li UC Davis) ji hêla Dr.Ew berê hatî diyar kirin û berhevokek xêzên cihêreng e ku veguherî nehesasiya wêne-periodê û stûyê piçûktir da ku mezinbûn û pêşkeftina nebatan li hawîrdorên Dewletên Yekbûyî hêsantir bike.Di vê lêkolînê de 510 rêzên ji vê nifûsê hatine bikar anîn her çend ji ber germbûna xirab û pirsgirêkên din ên kontrolkirina kalîteyê, ne hemî rêz di analîza her sê taybetmendiyan de hatine bikar anîn.Di dawiyê de daneyên ji 345 rêzan ji bo analîzkirina bersiva chitin, 472 rêz ji bo bersiva flg22, û 456 ji bo berxwedana TLS hatine bikar anîn.B. cookeistrain LSLP18 ji Dr. Burt Bluhm li zanîngeha Arkansas hat wergirtin.
Pîvana bersiva MAMP
Di vê lêkolînê de du MAMP-ên cihêreng hatin bikar anîn flg22, (kataloga Genscript# RP19986), û chitin.Nebatên sorgulê di nav deştên ku bi axê dagirtî (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) di serayê de hatine çandin.Nebat rojek beriya berhevkirina nimûneyê hatin avdan da ku di roja berhevkirinê de şilbûna pelan zêde nemîne.
Xet bi rasthatinî hatin kirin û ji ber sedemên lojîstîkî, di komikên 60 xetê de hatin çandin.Ji bo her rêzê sê 'potik' bi du tov di rêzê de hatin çandin.Komên paşîn bi qasî ku koma berê hate hilanîn heya ku tevahiya nifûsê were nirxandin hatin çandin.Du ceribandinên ceribandinê ji bo her du MAMP-ê bi jenotîpên ku di her du beşan de ji nû ve hatine rasthatin kirin hatine kirin.
Vekolînên ROS-ê wekî ku berê hatî destnîşan kirin hatin kirin.Bi kurtasî, ji bo her rêzekê, şeş tov di 3 polên cuda de hatin çandin.Ji tovên ku derketine, sê li ser bingeha yekrengiyê hatine hilbijartin.Şitilên ku ne asayî xuya dikirin an ji piraniyê pir dirêjtir an kurttir bûn, nehatin bikar anîn.Çar dîskên pelên 3 mm ji beşa herî berfireh a pelê 4-ê sê nebatên 15-rojî yên cûda yên sorgulê hatin derxistin.Ji her pelê yek dîskek ji du nebatan û du dîsk ji yek nebatê, digel ku dîska duyemîn dibe kontrola avê (li jêr binêre).Dîskên ferdî li ser 50 µl H20 di lewheyek reş a 96-kaniyê de hatin rijandin, bi mora aluminiumê ve hatin girtin da ku ji ronahiyê dûr nekevin, û bi şev li germahiya odeyê hatin girtin.Serê sibê çareseriyek reaksiyonê bi karanîna 2 mg/ml sondaja kîmyayî L-012 (Wako, katalog # 120-04891), 2 mg/ml peroksîdaza hespê (Tîpa VI-A, Sigma-Aldrich, kataloga # P6782), û 100 mg/ml Chitin an 2 μM Flg22.50 μl ji vê çareseriya reaksiyonê li sê ji çar bîran hate zêdekirin.Bîra çaremîn kontrolek xapînok bû, ku çareseriya reaksiyonê ya ku MAMP jê derdixe lê zêde bû.Çar bîrên vala yên ku tenê av tê de bûn jî di her tabelayê de cih girtin.
Piştî lê zêdekirina çareseriya reaksiyonê, luminescence bi bikaranîna SynergyTM 2-a pir-detektîfkerê xwendevana mîkroplate (BioTek) her 2 hûrdem ji bo 1 demjimêran hate pîvandin.Xwendevana plakê di nav vê 1 saetê de her 2 hûrdeman pîvandinên luminescence digire.Berhevoka hemî 31 xwendinê hate hesibandin ku nirxê her bîrekê bide.Nirxa texmînkirî ya ji bo bersiva MAMP-ê ji bo her jenotîp wekî (nirxa navînî ya ronahiyê ya sê bîrên ceribandinê - nirxa bîrê ya xapînok) -minus nirxa navîn a bîrê ya vala hate hesibandin.Nirxên bîrên vala bi domdarî nêzî sifirê bûn.
Dîskên pelê yênNicotiana benthamiana, yek xêza sorgulê ya bersivdar a bilind (SC0003), û yek xeta sorgulê ya bersivdar a nizm (PI 6069) jî ji bo mebestên kontrolkirina kalîteyê di her plakaya 96-kaniyê de wekî kontrol hatine bicîh kirin.
B. cookeiamadekirina derzîlêdanê û derzîlêdanê
B. cookeiînokûlm wekî ku berê hatî destnîşan kirin hate amadekirin.Bi kurtasî, gewherên sorgulê sê rojan di nav avê de hatin rijandin, hatin şuştin, di firaxên 1 lîtreyî yên konik de hatin qewirandin û demjimêrek di germahiya 15 psi û 121 °C de hate otoklava kirin.Dûv re dexl bi qasî 5 ml mîceliya macerated a ji çandek nû ve hatin vegirtinB. cookeiLSLP18 îzole dike û 2 hefte li germahiya odeyê tê hiştin, her 3 rojan carekê fîşekan dihejîne.Piştî 2 hefteyan, tovên sorgulê yên bi kêzikê ketine bi hewayê hatin zuwakirin û piştre di 4 °C de heta ku li zeviyê derzî bibin têne hilanîn.Heman derzîlêdanê ji bo tevahiya ceribandinê hate bikar anîn û her sal nû hate çêkirin.Ji bo derzîlêdanê, 6-10 gewherên gemarî di nav kulîlkên 4-5 hefteyî yên sorgulê de têne danîn.Sporên ku ji van fungî têne hilberandin di nav hefteyekê de di nebatên ciwan ên sorgulê de dest bi enfeksiyonê kirin.
Amadekirina tov
Berî ku li zeviyê were çandin, tovê sorgulê bi fungîsîd, kêzikek, û tevlêbûna ewlekar ku ~ 1% fungicide Spirato 480 FS, 4% fungicide Sebring 480 FS, 3% Sorpro 940 ES parastina tovê heye, hate derman kirin.Dûv re tov 3 rojan di hewayê de hatin zuwa kirin ku ji vê tevliheviyê li dora tovan pêçek tenik peyda kir.Paqijker destûr da ku karanîna herbicide Dual Magnum wekî dermankirinek pêşîn.
Nirxandina berxwedana Target Leaf Spot
SCP di 14-15-ê Hezîrana 2017-an û 20-ê Hezîrana 2018-an de li Stasyona Lêkolînê ya Zeviyên Navendî ya li Clayton, NC hate çandin.Ceribandin di rêzên yekane yên 1,8 m bi firehiya rêzê 0,9 m bi karanîna 10 tov li her pariyek hatine çandin.Du rêzikên sînorî li derdora her ceribandinê hatin çandin da ku pêşî li bandorên kenarê bigirin.Ceribandin di 20ê tîrmeha 2017ê û 20ê tîrmeha 2018an de hatin îsyankirin û li wê derê nebatên sorgoyê di qonaxa mezinbûnê ya 3yan de bûn. Rêjekirin li ser pîvanek yek heta neh hatin girtin, ku nebatên ku nîşanên nexweşiyê nîşan nadin wek neh û bi tevahî hatine tomar kirin. nebatên mirî wek yek hatin tomarkirin.Di sala 2017-an de du nirx hatin girtin û di sala 2018-an de çar xwendin ku her sal du hefte piştî derzîlêdanê dest pê dikin.sAUDPC (herêma standardkirî ya di binê kêşeya pêşkeftina nexweşiyê de) wekî ku berê hatî destnîşan kirin hate hesibandin.
Dema şandinê: Avrêl-01-2021