Materyalên nebatan û nexweşiyê
Nifûseke nexşerêya têkiliya sorgumê ku wekî nifûsa veguherîna sorgumê (SCP) tê zanîn, ji hêla Dr. Pat Brown ve li Zanîngeha Illinois (niha li UC Davis) hate peyda kirin. Ew berê jî hatiye vegotin û berhevokek ji xetên cihêreng e ku ji bo hêsankirina mezinbûn û pêşkeftina nebatan di jîngehên Dewletên Yekbûyî de ji bo bêhesasiyeta fotoperiod û mezinahiya piçûktir hatine veguheztin. 510 xetên ji vê nifûsê di vê lêkolînê de hatin bikar anîn, her çend ji ber geşbûna xirab û pirsgirêkên din ên kontrolkirina kalîteyê, ne hemî xetên di analîza her sê taybetmendiyan de hatin bikar anîn. Di dawiyê de daneyên ji 345 xetên ji bo analîza bersiva kîtîn, 472 xetên ji bo bersiva flg22, û 456 ji bo berxwedana TLS hatin bikar anîn.B. cookeicureya LSLP18 ji Dr. Burt Bluhm li Zanîngeha Arkansasê hat wergirtin.
Pîvana bersiva MAMP
Di vê lêkolînê de du MAMPên cuda hatin bikaranîn, flg22, (Genscript catalog# RP19986), û kîtîn. Nebatên sorghum di nav pêvekên ku li ser ax (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) tijî bûn di serayê de hatin çandin. Nebat rojek beriya berhevkirina nimûneyê hatin avdan da ku di roja berhevkirinê de şilbûna zêde ya pelan neyê.
Xet bi awayekî rasthatî hatin hilbijartin û ji ber sedemên lojîstîkî, di komên 60 xêzan de hatin çandin. Ji bo her rêzê, sê 'pot' bi du tov di her rêzê de hatin çandin. Komên piştre hema ku koma berê hate pêvajokirin heta ku tevahiya nifûsê hate nirxandin, hatin çandin. Ji bo her du MAMP-an du ceribandin hatin kirin ku genotîp di her du hewildanan de ji nû ve hatin rasthatîkirin.
Ceribandinên ROS wekî ku berê hatiye vegotin hatin kirin. Bi kurtasî, ji bo her rêzekê, şeş tov di 3 potên cuda de hatin çandin. Ji şitlên encam, sê li gorî yekrengiyê hatin hilbijartin. Şitlên ku neasayî xuya dikirin an jî ji piraniya wan pir dirêjtir an kurttir bûn nehatin bikar anîn. Çar dîskên pelan ên bi qutra 3 mm ji beşa herî fireh a pelê 4-an a sê nebatên sorgumê yên 15 rojî yên cûda hatin qut kirin. Ji her pelê yek dîsk ji du nebatan û ji yek nebatê du dîsk, û dîska duyemîn bû kontrola avê (li jêr binêre). Dîsk bi ferdî li ser 50 µl H20 di plakaya reş a 96-qulikan de hatin avjenî kirin, bi mohreke aluminiumê hatin mohr kirin da ku ji ronahiyê dûr bikevin, û tevahiya şevê di germahiya odeyê de hatin hiştin. Sibeha din çareseriyeke reaksiyonê bi karanîna 2 mg/ml proba kîmîlûmînesan L-012 (Wako, katalog # 120-04891), 2 mg/ml peroksîdaza horseradish (Cureyê VI-A, Sigma-Aldrich, katalog # P6782), û 100 mg/ml Kîtîn an 2 μM Flg22 hate çêkirin. 50 µl ji vê çareseriya reaksiyonê li sê ji çar bîran hate zêdekirin. Bîra çaremîn kontroleke sexte bû, ku çareseriya reaksiyonê ya bêyî MAMP lê hate zêdekirin. Çar bîrên vala yên ku tenê av tê de hebûn jî di her plakeyê de hatin zêdekirin.
Piştî zêdekirina çareseriya reaksiyonê, ronîbûn bi karanîna xwendevana mîkroplaqeya pir-tespîtkirinê ya SynergyTM 2 (BioTek) her 2 hûrdeman ji bo 1 demjimêrê hate pîvandin. Xwendevana plaqeyê di vê demjimêrê de her 2 hûrdeman pîvanên ronîbûnê digire. Ji bo dayîna nirxa her bîrê, berhevoka hemî 31 xwendinan hate hesabkirin. Nirxa texmînkirî ya bersiva MAMP ji bo her genotîpê wekî (nirxa navînî ya ronîbûna sê bîrên ceribandinê - nirxa bîrê ya sexte) - kêm nirxa navînî ya bîrê ya vala hate hesabkirin. Nirxên bîrên vala bi domdarî nêzîkî sifirê bûn.
Dîskên pelan ênNicotiana benthamiana, rêzek sorgumê ya bersivdayîna bilind (SC0003), û rêzek sorgumê ya bersivdayîna nizm (PI 6069) jî wekî kontrol di her plakaya 96-qulî de ji bo armancên kontrolkirina kalîteyê hatin zêdekirin.
B. cookeiamadekirina înokulumê û înokulasyonê
B. cookeiînokulum wekî ku berê hatiye vegotin hate amadekirin. Bi kurtasî, dendikên sorgumê sê rojan di nav avê de hatin şilkirin, hatin şuştin, hatin avêtin nav şûşeyên konîk ên 1L û saetekê di 15psi û 121°C de hatin otoklavkirin. Piştre dendik bi qasî 5 ml mîselyayên macerasyonkirî ji çandeke teze yaB. cookeiLSLP18 îzole kirin û 2 hefteyan li germahiya odeyê hiştin, her 3 rojan carekê firaxan bihejînin. Piştî 2 hefteyan, dendikên sorgûmê yên bi fungî ve dagirtibûn li hewayê hatin hişk kirin û dûv re di 4°C de heta derzîkirina zeviyê hatin hilanîn. Heman derzîkirin ji bo tevahiya ceribandinê hate bikar anîn û her sal teze hate çêkirin. Ji bo derzîkirinê, 6-10 dendikên vegirtî hatin xistin nav çerxa nebatan sorgûmê yên 4-5 hefteyî. Sporên ji van fungîyan çêbûn di nav hefteyekê de enfeksiyonê di nebatan sorgûmê yên ciwan de dest pê kirin.
Amadekirina tov
Berî çandina li zeviyê, tovên sorgumê bi tevliheviyek fungîsîd, kêzikkuj û parastîner ku ji ~ 1% fungîsîd Spirato 480 FS, 4% fungîsîd Sebring 480 FS, 3% parastînerê tovê Sorpro 940 ES pêk tê, hatin dermankirin. Piştre tov 3 rojan di hewayê de hatin zuwakirin, ku ev yek pêçek tenik ji vê tevliheviyê li dora tovan peyda kir. Parastîner rê da ku herbîsîda Dual Magnum wekî dermankirinek berî derketinê were bikar anîn.
Nirxandina berxwedana xala pelê hedef
SCP di 14-15ê Hezîrana 2017an û 20ê Hezîrana 2018an de li Stasyona Lêkolînên Çandiniyê ya Navendî li Clayton, NC bi sêwirana bloka tevahî ya rasthatî bi du dubarekirinên ceribandinê di her rewşê de hat çandin. Ceribandin di rêzên yekane yên 1.8 m de bi firehiya rêza 0.9 m bi karanîna 10 tov ji bo her zeviyê hatin çandin. Ji bo pêşîgirtina li bandorên qiraxan, du rêzên sînor li dora derdora her ceribandinê hatin çandin. Ceribandin di 20ê Tîrmeha 2017an û 20ê Tîrmeha 2018an de hatin derzîkirin, ku di wê demê de nebatên sorgum di qonaxa mezinbûnê ya 3an de bûn. Nirxandin li ser pîvanên ji yek heta neh hatin girtin, ku nebatên ku nîşanên nexweşiyê nîşan nedan wekî neh û nebatên bi tevahî mirî wekî yek hatin nirxandin. Di sala 2017an de du nirxandin û di sala 2018an de çar xwendin hatin girtin, ku her sal du hefte piştî derzîkirinê dest pê dikin. sAUDPC (qada standardkirî di bin xêza pêşveçûna nexweşiyê de) wekî ku berê hatiye vegotin hate hesibandin.
Dema weşandinê: 01-04-2021