Di vê lêkolînê de, bandorên teşwîqker ên dermankirina hevbeş arêkxerên mezinbûna nebatan(2,4-D û kînetîn) û nanopartikulên oksîda hesin (Fe₃O₄-NPs) li ser morfogeneza in vitro û hilberîna metabolîtên duyemîn di *Hypericum perforatum* L. de hatin lêkolînkirin. Dermankirina çêtirînkirî [2,4-D (0.5 mg/L) + kînetîn (2 mg/L) + Fe₃O₄-NPs (4 mg/L)] parametreyên mezinbûna nebatan bi girîngî baştir kir: bilindahiya nebatan %59.6, dirêjahiya reh %114.0, hejmara kulîlkan %180.0, û giraniya teze ya kalusê %198.3 li gorî koma kontrolê zêde bû. Vê dermankirina hevbeş her wiha karîgeriya vejînê (%50.85) zêde kir û naveroka hîperîsînê %66.6 zêde kir. Analîza GC-MS rêjeyên bilind ên hîperozîd, β-patholen, û alkola setîl nîşan da, ku ji sedî 93.36ê tevahiya qada lûtkeyê pêk tîne, di heman demê de rêjeya tevahî ya fenolîk û flavonoîdan heta sedî 80.1 zêde bûye. Ev encam nîşan didin ku rêkxerên mezinbûna nebatan (PGR) û nanopartikulên Fe₃O₄ (Fe₃O₄-NP) bi teşwîqkirina organogenezê û kombûna pêkhateyên biyoaktîf bandorek sinerjîk dikin, ku stratejiyek sozdar ji bo başkirina biyoteknolojîk a nebatan derman temsîl dike.
Giyarê St. John (Hypericum perforatum L.), ku wekî giyarê St. John jî tê zanîn, nebatek giyayî ya pirrsalî ya malbata Hypericaceae ye ku xwedî nirxek aborî ye.[1] Pêkhateyên wê yên biyoaktîv ên potansiyel tanînên xwezayî, ksanton, floroglucinol, naftalenedianthrone (hîperîn û pseudohîperîn), flavonoîd, asîdên fenolîk û rûnên bingehîn dihewîne.[2,3,4] Giyarê St. John dikare bi rêbazên kevneşopî were belav kirin; lêbelê, demsalîbûna rêbazên kevneşopî, şînbûna tovê kêm û meyla nexweşiyan potansiyela wê ji bo çandina mezin û çêbûna domdar a metabolîtên duyemîn sînordar dike.[1,5,6]
Ji ber vê yekê, çandina tevnên in vitro wekî rêbazek bi bandor ji bo belavbûna bilez a nebatan, parastina çavkaniyên germplazmayê, û zêdebûna berhema pêkhateyên dermanan tê hesibandin [7, 8]. Rêkxerên mezinbûna nebatan (PGR) di rêkxistina morfogenezê de roleke girîng dilîzin û ji bo çandina kallus û tevahiya organîzmayan in vitro pêwîst in. Optimîzasyona konsantrasyon û kombînasyonên wan ji bo temamkirina serketî ya van pêvajoyên pêşkeftinê girîng e [9]. Ji ber vê yekê, têgihîştina pêkhate û konsantrasyona guncaw a rêkxekaran ji bo baştirkirina mezinbûn û kapasîteya nûjenkirinê ya giyayê St. John (H. perforatum) girîng e [10].
Nanopartikulên oksîda hesin (Fe₃O₄) komek ji nanopartikulan in ku ji bo çandina tevnan hatine pêşxistin an jî tên pêşxistin. Fe₃O₄ xwedî taybetmendiyên magnetîkî yên girîng, biyo-hevahengiya baş, û şiyana pêşvebirina mezinbûna nebatan û kêmkirina stresa hawîrdorê ye, ji ber vê yekê di sêwirana çandina tevnan de bala girîng kişandiye. Bikaranînên potansiyel ên van nanopartikulan dikarin çêtirkirina çandina in vitro ji bo pêşvebirina dabeşbûna hucreyan, baştirkirina wergirtina xurdemeniyan, û çalakkirina enzîmên antîoksîdan bin [11].
Her çend nanopartikulan bandorên baş ên pêşvebirinê li ser mezinbûna nebatan nîşan dane jî, lêkolînên li ser sepandina hevbeş a nanopartikulên Fe₃O₄ û rêkxerên mezinbûna nebatan ên çêtirînkirî di *H. perforatum* de kêm in. Ji bo dagirtina vê valahiya zanînê, vê lêkolînê bandorên bandorên wan ên hevbeş li ser morfogeneza in vitro û hilberîna metabolîtên duyemîn nirxand da ku têgihiştinên nû ji bo baştirkirina taybetmendiyên nebatan derman peyda bike. Ji ber vê yekê, ev lêkolîn du armanc hene: (1) baştirkirina konsantrasyona rêkxerên mezinbûna nebatan da ku bi bandor avakirina kallus, nûvekirina şitilan û kokkirinê in vitro pêşve bibin; û (2) nirxandina bandorên nanopartikulên Fe₃O₄ li ser parametreyên mezinbûnê in vitro. Planên pêşerojê nirxandina rêjeya saxmayîna nebatan a ji nû ve hatî çêkirin di dema aklîmatîzasyonê de (in vitro) vedihewîne. Tê payîn ku encamên vê lêkolînê dê bi girîngî bandora mîkropropagasyona *H. perforatum* baştir bikin, bi vî rengî beşdarî karanîna domdar û sepanên biyoteknolojîk ên vê nebata derman a girîng bibin.
Di vê lêkolînê de, me pelên nebatan ji nebatan salane yên St. John's wort (nebatên dayik) ên li zeviyê hatine çandin bi dest xistin. Ev nebat ji bo baştirkirina şert û mercên çandina in vitro hatin bikar anîn. Berî çandinê, pel bi tevahî di bin ava distîlkirî ya herikî de çend deqeyan hatin şuştin. Paşê rûyên nebatan bi danîna nav etanola %70 bo 30 saniyan hatin dezenfektekirin, dû re jî bi danîna nav çareseriyek %1.5 sodyûm hîpoklorît (NaOCl) ku çend dilopên Tween 20 tê de hene bo 10 deqeyan hatin danîn. Di dawiyê de, nebatan sê caran bi ava distîlkirî ya sterîl berî ku werin veguheztin navgîna çandina din hatin şuştin.
Di çar hefteyên pêş de, parametreyên ji nû ve çêkirina şitilan hatin pîvandin, di nav de rêjeya ji nû ve çêkirina şitilan, hejmara şitilan ji bo her şitilek piçûk û dirêjahiya şitilan. Dema ku şitilên ji nû ve çêkirî gihîştin dirêjahiya herî kêm 2 cm, ew hatin veguheztin navgînek rehkirinê ku ji navgînek MS ya nîv-hêz, 0.5 mg/L asîda îndolebutîrîk (IBA), û 0.3% goma guar pêk dihat. Çanda rehkirinê sê hefteyan berdewam kir, di vê demê de rêjeya rehkirinê, hejmara kokan û dirêjahiya kokan hatin pîvandin. Her dermankirin sê caran hate dubarekirin, di her dubarekirinê de 10 şitil hatin çandin, ku bi qasî 30 şitil ji bo her dermankirinê çêbû.
Bilindahiya nebatan bi karanîna rêzikê, ji bingeha nebatan heta serê pelê herî bilind, bi santîmetreyan (cm) hat pîvandin. Dirêjahiya reh piştî ku bi baldarî şitl hatin rakirin û navgîna mezinbûnê hat rakirin, yekser bi mîlîmetreyan (mm) hat pîvandin. Hejmara kulîlkên her şitlê rasterast li ser her nebatê hat jimartin. Hejmara xalên reş ên li ser pelan, ku wekî girêk têne zanîn, bi dîtbarî hat pîvandin. Tê bawerkirin ku ev girêkên reş rijênên ku hîperîsîn, an xalên oksîdatîf, dihewînin in û wekî nîşaneyek fîzyolojîk a bersiva nebatan a li hember dermankirinê têne bikar anîn. Piştî rakirina hemî navgîna mezinbûnê, giraniya teze ya şitlan bi karanîna pîvanek elektronîkî bi rastbûna mîlîgram (mg) hat pîvandin.
Rêbaza hesabkirina rêjeya çêbûna kalusê wiha ye: piştî çandina ekplantan di navgînek ku tê de rêkxerên mezinbûnê yên cûrbecûr (kînaz, 2,4-D, û Fe3O4) hene bo çar hefteyan, hejmara ekplantên ku dikarin kalusê çêbikin tê hejmartin. Formula ji bo hesabkirina rêjeya çêbûna kalusê wiha ye:
Her dermankirin sê caran hate dubarekirin, di her dubarekirinê de herî kêm 10 ekplant hatin lêkolînkirin.
Rêjeya nûjenbûnê rêjeya tevna kalusê nîşan dide ku piştî qonaxa çêbûna kalusê pêvajoya cûdakirina kulîlkan bi serkeftî temam dike. Ev nîşander şiyana tevna kalusê nîşan dide ku veguhere tevna cihêrengkirî û mezin bibe bo organên nû yên nebatan.
Koefîsyenta rehkirinê rêjeya hejmara şaxên ku dikarin reh bikin, bi hejmara giştî ya şaxan re ye. Ev nîşander serkeftina qonaxa rehkirinê nîşan dide, ku di mîkropropagasyon û belavbûna nebatan de pir girîng e, ji ber ku rehkirina baş alîkariya nebatan dike ku di şert û mercên mezinbûnê de çêtir bijîn.
Têkelên hîperîsînê bi 90% metanolê hatin derxistin. Pêncî mg ji materyalên nebatî yên hişk li 1 ml metanolê hatin zêdekirin û ji bo 20 deqeyan bi 30 kHz di paqijkerek ultrasonîk (modela A5120-3YJ) de di germahiya odeyê de di tariyê de bi sonîkasyonê hatin kirin. Piştî sonîkasyonê, nimûne ji bo 15 deqeyan bi 6000 rpm hate santrifûjkirin. Supernatant hate berhevkirin, û vegirtina hîperîsînê li 592 nm bi karanîna spektrofotometreyek Plus-3000 S li gorî rêbaza ku ji hêla Conceiçao et al. [14] ve hatî vegotin hate pîvandin.
Piraniya dermankirinên bi rêkxerên mezinbûna nebatan (PGR) û nanopartikulên oksîda hesin (Fe₃O₄-NP) li ser pelên şitlên ji nû ve hatine çêkirin, nebû sedema çêbûna girêkên reş. Di tu dermankirinên bi 0.5 an 1 mg/L 2,4-D, 0.5 an 1 mg/L kînetîn, an 1, 2, an 4 mg/L nanopartikulên oksîda hesin de ti girêk nehatin dîtin. Çend kombînasyonan di rêjeyên bilindtir ên kînetîn û/an nanopartikulên oksîda hesin de zêdebûnek sivik di pêşveçûna girêkan de nîşan dan (lê ne ji hêla îstatîstîkî ve girîng) wekî kombînasyona 2,4-D (0.5–2 mg/L) bi kînetîn (1–1.5 mg/L) û nanopartikulên oksîda hesin (2–4 mg/L). Ev encam di Wêne 2 de têne nîşandan. Girêkên reş rijênên dewlemend ên hîperîsînê temsîl dikin, hem bi xwezayî çêdibin û hem jî sûdmend in. Di vê lêkolînê de, girêkên reş bi giranî bi qehweyîbûna tevnan ve girêdayî bûn, ku hawîrdorek guncan ji bo kombûna hîperîsînê nîşan dide. Dermankirina bi nanopartikulên 2,4-D, kînetin, û Fe₃O₄ mezinbûna kallusê pêş xist, qehweyîbûn kêm kir, û naveroka klorofîlê zêde kir, ku ev yek fonksiyona metabolîk a çêtir û kêmkirina potansiyel a zirara oksîdatîf nîşan dide [37]. Vê lêkolînê bandorên kînetin bi hev re bi nanopartikulên 2,4-D û Fe₃O₄ re li ser mezinbûn û pêşveçûna kallusa giyayê St. John nirxand (Wêne 3a–g). Lêkolînên berê nîşan dane ku nanopartikulên Fe₃O₄ xwedî çalakiyên dijî-fungî û dijî-mîkrobî ne [38, 39] û, dema ku bi rêkûpêkkerên mezinbûna nebatan re werin bikar anîn, dikarin mekanîzmayên parastina nebatan teşwîq bikin û nîşaneyên stresa hucreyî kêm bikin [18]. Her çend biyosenteza metabolîtên duyemîn bi genetîkî ve tê rêvebirin jî, hilberîna wan a rastîn pir girêdayî şert û mercên hawîrdorê ye. Guhertinên metabolîk û morfolojîk dikarin bi rêkxistina îfadeya genên nebatan ên taybetî û bersivdayîna faktorên hawîrdorê bandorê li ser asta metabolîtên duyemîn bikin. Wekî din, înduktêr dikarin çalakkirina genên nû bidin destpêkirin, ku ev jî di encamê de çalakiya enzîmatîk teşwîq dike, di dawiyê de gelek rêyên biyosentezê çalak dike û dibe sedema çêbûna metabolîtên duyemîn. Herwiha, lêkolîneke din nîşan da ku kêmkirina siyê tîrêjên rojê zêde dike, bi vî awayî germahiya rojê di jîngeha xwezayî ya *Hypericum perforatum* de bilind dike, ku ev jî dibe sedema zêdebûna hilberîna hîperîsînê. Li ser bingeha van daneyan, vê lêkolînê rola nanopartikulên hesin wekî teşwîqkerên potansiyel di çanda tevnê de lêkolîn kir. Encam nîşan dan ku ev nanopartikul dikarin genên ku di bîyosenteza hesperidînê de beşdar in bi rêya teşwîqkirina enzîmatîk çalak bikin, ku dibe sedema zêdebûna kombûna vê terkîbê (Wêne 2). Ji ber vê yekê, li gorî nebatan ku di bin şert û mercên xwezayî de mezin dibin, dikare were gotin ku hilberîna van terkîban di vivo de jî dikare were zêdekirin dema ku streseke nerm bi çalakkirina genên ku di bîyosenteza metabolîtên duyemîn de beşdar in re were hev kirin. Dermankirinên tevlihev bi gelemperî bandorek erênî li ser rêjeya nûvekirinê dikin, lê di hin rewşan de, ev bandor qels dibe. Bi taybetî, dermankirina bi 1 mg/L 2,4-D, 1.5 mg/L kînaz, û konsantrasyonên cûda dikare bi awayekî serbixwe û girîng rêjeya nûvekirinê bi 50.85% li gorî koma kontrolê zêde bike (Wêne 4c). Ev encam nîşan didin ku kombînasyonên taybetî yên nanohormonan dikarin bi hev re tevbigerin da ku mezinbûna nebatan û hilberîna metabolîtan pêşve bibin, ku ev yek ji bo çanda tevnê ya nebatan dermanan pir girîng e. Palmer û Keller [50] nîşan dan ku dermankirina 2,4-D dikare bi awayekî serbixwe çêbûna kalusê di St. perforatum de teşwîq bike, di heman demê de zêdekirina kînazê çêbûn û nûjenkirina kalusê bi girîngî zêde kir. Ev bandor ji ber başbûna hevsengiya hormonal û teşwîqkirina dabeşbûna hucreyan bû. Bal û hevkarên wî [51] dîtin ku dermankirina Fe₃O₄-NP dikare bi awayekî serbixwe fonksiyona enzîmên antîoksîdan zêde bike, bi vî rengî mezinbûna kokê di St. perforatum de pêşve bibe. Medyaya çandî ya ku nanopartikulên Fe₃O₄ di nav de di konsantrasyonên 0.5 mg/L, 1 mg/L, û 1.5 mg/L de hene, rêjeya nûjenkirina nebatan baştir kir [52]. Bikaranîna kînetîn, 2,4-dîklorobenzotiyazolînon, û nanopartikulên Fe₃O₄ rêjeyên çêbûna kallus û reh bi girîngî baştir kir, lêbelê, bandorên alî yên potansiyel ên karanîna van hormonan ji bo vejîna in vitro divê werin hesibandin. Mînakî, karanîna demdirêj an jî bi konsantrasyona bilind a 2,4-dîklorobenzotiyazolînon an kînetîn dikare bibe sedema guherîna klonal a somatîk, stresa oksîdatîf, morfolojiya kallusê ya neasayî, an jî vîtrîfîkasyonê. Ji ber vê yekê, rêjeyek vejîna bilind ne hewce ye ku aramiya genetîkî pêşbînî bike. Divê hemî nebatên vejînkirî bi karanîna nîşankerên molekulî (mînak RAPD, ISSR, AFLP) an analîza sîtogenetîk werin nirxandin da ku homojenî û dişibiya wan bi nebatên in vivo were destnîşankirin [53,54,55].
Ev lêkolîn cara yekem nîşan da ku bikaranîna hevbeş a rêkxerên mezinbûna nebatan (2,4-D û kînetîn) bi nanopartikulên Fe₃O₄ re dikare morfogenezê û kombûna metabolîtên biyoaktîf ên sereke (di nav de hîperîsîn û hîperozîd) di *Hypericum perforatum* de zêde bike. Rejîma dermankirinê ya çêtirînkirî (1 mg/L 2,4-D + 1 mg/L kînetîn + 4 mg/L Fe₃O₄-NPs) ne tenê çêbûna kallus, organogenez û hilberîna metabolîtên duyemîn zêde kir, lê di heman demê de bandorek nerm a teşwîqkirinê jî nîşan da, ku potansiyel toleransa stresê û nirxa dermanî ya nebatan baştir dike. Têkeliya nanoteknolojiyê û çanda tevna nebatan platformek domdar û bibandor ji bo hilberîna in vitro ya pêkhateyên dermanî di pîvanek mezin de peyda dike. Ev encam rê li ber sepanên pîşesaziyê û lêkolînên pêşerojê yên li ser mekanîzmayên molekulî, çêtirkirina dozê û rastbûna genetîkî vedikin, bi vî rengî lêkolîna bingehîn a li ser nebatan derman bi biyoteknolojiya pratîkî ve girêdide.
Dema weşandinê: 12ê Kanûna Pêşîn a 2025an