Fosforîlasyon rêgeza sereke ya mezinbûnê DELLA di Arabidopsis de bi pêşvexistina têkiliya hîstone H2A bi kromatînê re çalak dike.

Proteînên DELLA master têne parastinrêkxerên mezinbûnêku di kontrolkirina pêşkeftina nebatan de di bersivdayîna nîşanên hundurîn û hawîrdorê de rolek navendî dilîzin. DELLA wekî rêgezek transkrîpsiyonê tevdigere û ji bo ku bi navgîniya domana xweya GRAS-ê ve bi faktorên veguheztinê (TF) û hîstone H2A ve girêbide, ji bo pêşvebiran armanc digire. Lêkolînên vê dawîyê destnîşan kirin ku aramiya DELLA bi du mekanîzmayan piştî-wergerandinê tê rêve kirin: polyubiquitination ku ji hêla phytohormone gibberellin ve hatî çêkirin, ku dibe sedema hilweşîna wê ya bilez, û berhevkirina guhêrbarên piçûk ên mîna ubiquitin (SUMO) da ku berhevkirina wê zêde bike. Wekî din, çalakiya DELLA ji hêla du glycosylasyonên cihêreng ve bi dînamîk ve tête rêve kirin: Têkiliya DELLA-TF ji hêla O-fucosylation ve tête zêdekirin lê ji hêla guhertoya N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ve girêdayî O-girêdayî tê asteng kirin. Lêbelê, rola fosforîlasyona DELLA ne diyar dimîne, ji ber ku lêkolînên berê encamên nakokî nîşan dane, ji yên ku destnîşan dikin ku fosforîlasyon hilweşîna DELLA pêşve dike an kêm dike heya yên din ku destnîşan dikin ku fosforîlasyon bandorê li aramiya wê nake. Li vir, em malperên fosforîlasyonê di REPRESSOR de nas dikinga1-3(RGA, AtDELLA) ji Arabidopsis thaliana bi analîza spektrometrîya girseyî ve hatî paqij kirin û destnîşan dike ku fosforîlasyona du peptîdên RGA li herêmên PolyS û PolyS/T girêdana H2A û çalakiya RGA zêde dike. Komeleya RGA bi pêşvebirên armanc. Bi taybetî, fosforîlasyon bandorê li têkiliyên RGA-TF an aramiya RGA nake. Lêkolîna me mekanîzmaya molekularî ya ku bi fosforîlasyon çalakiya DELLA-yê çêdike eşkere dike.
Ji bo ronîkirina rola fosforîlasyonê di birêkûpêkkirina fonksiyona DELLA de, girîng e ku meriv cîhên fosforîlasyona DELLA di vivo de nas bike û di nebatan de analîzên fonksiyonel bike. Bi paqijkirina pêwendiya ekstraktên nebatî û li dûv analîza MS/MS, me di RGA de gelek fosfosîtan nas kir. Di şert û mercên kêmbûna GA de, fosforîlasyona RHA zêde dibe, lê fosforîlasyon bandorê li aramiya wê nake. Ya girîng, vekolînên co-IP û ChIP-qPCR eşkere kirin ku fosforîlasyon li herêma PolyS/T ya RGA pêwendiya wê bi H2A re û têkiliya wê bi pêşengên armanc re pêşve dike, mekanîzmaya ku fosforîlasyon fonksiyona RGA çêdike eşkere dike.
RGA ji bo armanckirina kromatînê bi navgîniya danûstendina subdomaina LHR1 bi TF-ê re tê peywirdar kirin û dûv re bi navgîniya herêma PolyS/T û jêrdomîna PFYRE bi H2A ve girêdide, kompleksa H2A-RGA-TF ava dike da ku RGA aram bike. Fosforîlasyona Pep 2 li herêma PolyS/T ya di navbera qada DELLA û qada GRAS de ji hêla kînasek nenas ve girêdana RGA-H2A zêde dike. Proteîna mutant rgam2A fosforîlasyona RGA radike û konformek proteînek cûda dipejirîne da ku bi girêdana H2A re asteng bike. Ev dibe sedema bêîstîkrarkirina danûstendinên TF-rgam2A yên demkî û veqetandina rgam2A ji kromatîna armancê. Ev jimar tenê tepeserkirina transkripsiyonê ya bi navbeynkariya RGA-ê nîşan dide. Nimûneyek wusa dikare ji bo aktîvkirina transkripsiyonê ya bi navbeynkariya RGA-ê were binav kirin, ji bilî ku kompleksa H2A-RGA-TF dê veguherîna genê armanc pêşve bibe û defosforîlasyona rgam2A dê transkripsiyonê kêm bike. Figure ji Huang et al.21 hate guherandin.
Hemî daneyên mîqdar bi karanîna Excel-ê bi îstatîstîkî ve hatin analîz kirin, û cûdahiyên girîng bi karanîna testa Student t hate destnîşankirin. Ji bo pêşîlêgirtina mezinahiya nimûneyê tu rêbazên îstatîstîkî nehatin bikar anîn. Ti data ji analîzê nehatin derxistin; azmûn ne rasthatinî bû; lêkolîner ji belavkirina daneyan di dema ceribandinê û nirxandina encaman de kor nebûn. Mezinahiya nimûneyê di efsaneya wêneyê û pelê daneya çavkaniyê de tê destnîşan kirin.
Ji bo bêtir agahdarî di derbarê sêwirana lêkolînê de, li Serpêhatiya Rapora Portfolio ya Xwezayî ku bi vê gotarê ve girêdayî ye, bibînin.
Daneyên proteomîk ên spektrometrîya girseyî bi navgîniya depoya hevpar a PRIDE66 bi nasnavê databasê PXD046004 ve ji konsorsiyuma ProteomeXchange re hatine beşdar kirin. Hemî daneyên din ên ku di vê lêkolînê de hatine bidestxistin di Agahiyên Pêvek, Pelên Daneyên Pêvek, û Pelên Daneyên Raw de têne pêşkêş kirin. Daneyên çavkaniyê ji bo vê gotarê têne peyda kirin.